기내 천궁의 온도·화학요법 병행 처리에 의한 바이러스 제거

김지아*

(국립산림과학원 산림약용자원연구소)

Virus elimination from in vitro Cnidium officinale Makino by thermotherapy combined with chemotherapy

Ji-A Kim*

(Forest Medicinal Resources Research Center, National institute of Forest Science)

요약: 우리는 다양한 온도에서의 온열 요법 및 다양한 농도의 리바비린을 사용한 화학요법, 그리고 이 두 가지 방법의 조합으로 천궁에서 바이러스를 제거하는 효과를 연구하였다. 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus、CMV)와 사과 줄기홈 바이러스(Apple stem grooving virus、ASGV)에 감염된 기내식물체를 재료로 사용하였다. 식물의 생존 및 재분화를 평가하고, 바이러스 제거 효율을 각 바이러스에 대해 두 개의 프라이머를 사용하는 RT-PCR로 진단하였다. 재분화를 위한 다경지의 유도는 경화제로 0.2 % 겔라이트를 사용하였고 6-benzylaminopurine (BAP) 0.5mg/L가 첨가된 MS배지에서 배양하여 줄기끝 생장점으로부터 다경지를 유도하였다. 바이러스 제거 효율은 온열 요법과 화학 요법을 결합하여 향상되었다. 화학 요법으로 리바비린(20mg/L)과 온열 요법(33 ℃, 4주)을 병용한 처리에서 20%의 바이러스 제거효율을 보였다. 온열 요법(33 ℃) 또는 화학 요법(20 mg/L)  단독 처리는 바이러스 제거 효율이 저조하였다. 그러나 리바비린과 온열 요법을 병행 한 후 생장점 배양은 CMV와 ASGV를 제거하는 데 효과적이었다. 결과적으로 이 연구에서는 천궁의 바이러스를 제거하기 위한 적정 바이러스 제거 방법의 확립이 중요하다는 것을 보여주었다.

Abstract: We studied the effectiveness of thermotherapy at different temperatures, chemotherapy with different concentrations of ribavirin, and combinations of these two methods on virus elimination from Cnidium officinale Makino (Apiaceae). We used in vitro plantlets infected with Cucumber mosaic virus (CMV) and Apple stem grooving virus (ASGV). The survival and regeneration of plants were evaluated, and the efficiency of virus eradication was determined by RT-PCR with two primer pairs for each virus. Multiple shoots for regeneration were induced from the apical domes of shoot tips by culturing them on Murashige and Skoog (MS) media solidified with 0.2% gelrite and supplemented with 6-benzylaminopurine (BAP) 0.5mg/L. The virus elimination efficiency was enhanced by combining thermotherapy and chemotherapy treatments. A treatment combining ribavirin (20 mg/L) and thermotherapy at 33℃ resulted in high virus eradication efficiency (20.0 %). Thermotherapy treatments (33℃) or chemotherapy treatments (20 mg/L ribavirin) alone were less efficient to obtain virus-free C. officinale plants. However, the combined ribavirin and thermotherapy treatment followed by culturing of shoot tips was highly effective for eliminating CMV and ASGV. As a result, this studys showed that it’s important to establish an appropriate virus eradication method to control C. officinale viruses.